亚洲国产精品自拍_亚洲一区二区三区四区五区中文_久久精品99视频_综合色爱_精品国产一区二区在线_亚洲成人观看

撥號18914489393
產品目錄
展開

你的位置:首頁 > 技術文章 > 超聲波DNA打斷儀實驗案例

技術文章

超聲波DNA打斷儀實驗案例

技術文章
瀏覽次數:3341

實驗案例

現在的高通量測序平臺(主要是illumina)在直接測序時只能測出200bp長度的序列,因此建庫方案是將DNA .片段化為200bp,然后深度測序后,后將序列拼接。我公司自主研發的非接觸聚能式超聲波DNA打斷儀可以在不接觸樣品的情況下隔著EP管將細胞DNA鏈至打斷至200bp或是更小。

 

實驗目的:將收集的細胞DNA..片段化

樣品:鼠源乳腺癌細胞4T1

人源肝癌細胞HepG2

人源耐藥子宮肉瘤細胞MES-SA/DX5

 

實驗步驟:

  • 交聯: 取1皿細胞(10 cm平皿),10 mL培養基中加入270 uL  37%甲醛,使得甲醛的終濃度為1%,輕輕搖勻,37℃ 孵育10 min。
  • 終止交聯:加甘氨酸至終濃度為0.125 M。550 ul 2.5 M甘氨酸于平皿中。輕輕搖勻,在室溫下放置5 min即可。
  •  棄凈培養基,用冰冷的含1 mM  PMSF 的PBS清洗細胞2次每次5-10mL。
  •  加入3 ml冰冷的含1mM  PMSF的PBS細胞刮刀收集細胞于離心管中,用PBS清洗培養皿兩次,收集到離心管中
  •  預冷后2000 rpm離心 5 min收集細胞。
  •  新鮮配置一定體積的蛋白酶抑制劑復合物和SDS Lysis Buffer充分混勻
  •  棄上清,加入一定體積含有蛋白酶抑制劑復合物SDS Lysis Buffer,重懸細胞。
  •  冰上放置10min
  •  開啟冷循環泵,并降溫至4℃以下。
  •  開啟超聲波DNA打斷儀將程序調制循環模式,超聲20s停10s。 
  •  啟動機器至超聲結束
  •  加解交聯試劑65℃ 解交聯4h以上,可過夜解交聯
  •  將超聲過的樣品提取DNA. 片
  •  1.5%-2%瓊脂糖凝膠電泳15min
  •  拍照

人源骨肉瘤細胞U2OS

聯系我們

地址:南京市江寧區天元中路68號 傳真:86-025-87132665 Email:njymnl17@163.com
24小時在線客服,為您服務!

版權所有 © 2025 南京以馬內利儀器設備有限公司 備案號:蘇ICP備11020524號-3 技術支持:化工儀器網 管理登陸 sitemap.xml

在線咨詢
QQ客服
QQ:727270821
電話咨詢
86-025-87132665/66918106
關注微信
主站蜘蛛池模板: 亚洲精品久久久久久下一站 | 久久伦理中文字幕 | 91精品在线观看入口 | 国产成人免费视频网站视频社区 | 国产精品久久久视频 | 亚洲国产免费看 | 欧美激情一区二区三区 | 色呦呦日韩 | 欧美专区在线观看 | 91在线综合| 亚洲精品免费观看视频 | 超黄网站| www.午夜视频 | 成人深夜视频 | 激情欧美一区二区 | 夜夜骚| 美国黄色毛片女人性生活片 | 久久久久国产视频 | 国产成人精品免高潮在线观看 | 免费的国产视频 | 国产一区二区三区色淫影院 | 亚洲国产成人精品女人 | 91久久综合 | 午夜免费小视频 | 日韩伦理一区二区三区 | 九九热这里只有精品6 | 男女羞羞视频在线免费观看 | 亚洲午夜一区 | 黑人巨大精品欧美一区二区小视频 | 午夜精品久久久久久99热软件 | 日韩成人精品视频在线观看 | 天天色天天草 | 久久国产精品视频 | 久久伊| 在线观看一区二区视频 | 污网站观看| 久久精品毛片 | 国产第3页| 精品一区二区三区中文字幕 | 免费国产在线视频 | 免费看的黄色大片 |